檢出限(LOD)或定量限(LOQ)的測定通常是在目標(biāo)物的含量在接近于零的時(shí)候才需要進(jìn)行測定。
什么時(shí)候需要進(jìn)行測定?
檢出限(LOD)或定量限(LOQ)的測定通常是在目標(biāo)物的含量接近于“零”的時(shí)候才需要進(jìn)行測定。當(dāng)方法應(yīng)用于所測定的分析物濃度要比定量限大的多時(shí),檢出限與定量限評定就顯的不是非常有必要了。但是對于那些濃度接近于檢出限與定量限的痕量和超痕量測試,常報(bào)出“未檢出”時(shí),這時(shí)檢出限或定量限對于風(fēng)險(xiǎn)評估或法規(guī)決策則就顯得非常的重要。
不同的基體需要獨(dú)立評估其檢出限和定量限
檢出限(LOD)?
對于大多數(shù)現(xiàn)代的分析方法檢出限(LOD)分為兩個(gè)部分,方法檢出限(MDL)和儀器檢出限(IDL)。。。
方法檢出限是在應(yīng)用在某個(gè)具體基體內(nèi)的分析物的測定,可定義分析物質(zhì)能在可靠將分析物測定信號區(qū)別于特定基體背景(噪音)的zui低濃度或量。
換句話說,方法檢出限就是方法中測定出大于相關(guān)不確定度的zui低量(Taylor,1989)。在分析方法檢出限(MDL)時(shí)需要靠考慮到所有基體的干擾。
方法的檢出限不應(yīng)與儀器zui低響應(yīng)值相混淆
使用信噪比可作為考察儀器性能的一個(gè)有用的指標(biāo),但不適用于評估方法檢出限。目前大多數(shù)的分析都是利用設(shè)備進(jìn)行分析,但每個(gè)設(shè)備對于所檢測的分析物的量都會(huì)有一定檢出能力。這種檢出能力可用儀器檢出限(IDL)進(jìn)行表示。儀器檢出限可定義為儀器能將目標(biāo)物與設(shè)備背景相區(qū)別或可靠檢測的zui低量(儀器噪音)。隨著靈敏度增加,IDL降低,儀器噪音降低,IDL也降低。
可多種方法確定檢出限,羅列出應(yīng)用評定檢出限的一些方法
1、基于虛擬(visual)評估LOD:
Visual評估可應(yīng)用于非儀器方法和儀器分析方法,同時(shí)也可應(yīng)用于定性測試方法的評估。
通過在樣品空白中添加已經(jīng)濃度的分析,后評定能夠可靠被檢測出的zui低濃度值。
在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物。在每一個(gè)濃度點(diǎn)需要進(jìn)行約7次的獨(dú)立測試。各個(gè)濃度點(diǎn)的重復(fù)性測試應(yīng)該隨機(jī)性。對于定性分析,通過繪制陽性百分比(陰性)與濃度之間的響應(yīng)曲線,檢查確定哪個(gè)濃度閾值是不可靠的。
2、空白標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行評定LOD
通過分析大量的空白進(jìn)行評定(推薦20個(gè)以上)。樣品空白獨(dú)立測試的次數(shù)(n大于10以上),以及加入zui低可接受濃度的樣品空白測試次數(shù)(n大于10次以上)。LOD的可用樣品空白平均值值加上3被標(biāo)準(zhǔn)偏差。(0+3S)
3、基于校準(zhǔn)曲線的LOD評定
如果LOD數(shù)據(jù)或與LOD相近的數(shù)據(jù)無法得到,則可利用校準(zhǔn)曲線的參數(shù)進(jìn)行評估。用空白加上空白的3倍偏差,儀器對于空白的響應(yīng)可用方程截距a表示,儀器響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差可用校準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)偏差Sy/x來表示。故可利用方程yLOD=a+3sy/x=a+bxLOD,則xLOD=3sy/x/b.這個(gè)方程廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)。然而由于這是推斷,當(dāng)濃度接近于期望LOD時(shí),則所測定的數(shù)據(jù)就會(huì)顯得不那么可靠,建議當(dāng)濃度接近于LOD時(shí),需要證明要在合適的置信區(qū)間內(nèi)能夠被測定出來(可靠的被測定出來)。
4、基于信噪比LOD
由于儀器分析過程都會(huì)有背景噪音,常用的方法就是利用已經(jīng)低濃度的分析物與空白樣品的測量信號進(jìn)行比較,確定出能夠可靠測定出的zui小的濃度,zui典型的可接受的信噪比是2:1或3:1。
定量限LOQ
定量限同樣是指檢測限,然而定量限與LOD是有區(qū)別。類似于LOD,LOQ也可以分成兩個(gè)部分,方法定量限(MQL)和儀器定量限(IQL)
方法定量限可定義為在特定基體中在某一可信度(a certain degree)內(nèi)對分析物能進(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的zui低濃度值。
儀器定量限可定義為儀器能夠?qū)Ψ治鑫镞M(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的zui低濃度值。
定量限可以用分析物在樣品中的濃度來表示(百分比,ppb)表示。多種慣例采用于LOQ的評估。主要是從其可信性(certainty)考慮(如測試是否基于法規(guī)目的,測試不確定度和可接受準(zhǔn)則等),zui普遍可接受的是將空白加上10倍的重復(fù)標(biāo)準(zhǔn)作為LOQ或3倍的LOD(給出了更大的數(shù))或高于方法確認(rèn)中使用zui低加標(biāo)的50%作為LOQ.為了使數(shù)據(jù)更加的可信性,LOQ可用10的LOD來表示。在某一特定測試領(lǐng)域其它因素可以應(yīng)用,那么機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)將那些現(xiàn)行的因素考慮在內(nèi)。
定量限是在特定的基體和方法評估的,不同機(jī)構(gòu)之間或在同個(gè)機(jī)構(gòu)內(nèi)由于不同設(shè)備、技術(shù)和試劑不同而有差異。
報(bào)告檢出限LOR
報(bào)告檢出限是實(shí)際定量限或高于LOQ. LOD-快速參考
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